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L'Annonciation du Titien fut acquise par la confrérie de la Scuola grande di San Rocco en 1555 grâce au legs du juriste Melio da Cortona, qui stipulait qu'elle soit placée « à l'auberge ou dans la salle », au choix des frères. En réalité, elle fut installée au-dessus d'une des arches du palier du Grand Escalier, dans un cadre richement sculpté et doré orné des armoiries du donateur.
Sa composition est d'une remarquable simplicité : les figures de la Vierge et de l'ange se détachent sur une architecture réduite à une balustrade de marbre et à une série de colonnes, tandis qu'un vaste paysage s'ouvre à l'arrière-plan. L'attribution de l'œuvre au Titien, jadis parfois mise en doute par les critiques, est aujourd'hui unanimement acceptée, avec une datation aux alentours de 1535.
Ce n'est que plus tard que Jacopo Tintoretto fut chargé de peindre La Visitation, œuvre pendante, au-dessus de l'autre arche du même palier.