L'artiste a choisi de présenter un Prométhée créateur, façonnant l'homme avec de la terre glaise en présence de son frère Epithémée. Piero envoie ensuite le héros à la rencontre de Minerve, qui le conduit au ciel (panneau de Munich).

Puis Prométhée dérobe le feu au char du soleil, afin de redonner le feu aux hommes. Les dieux créent Pendore et l'envoient à Epithémée. Promethée subit enfin la terrible punition de Zeus, attaché à l'arbre, venu se substituer au rocher du mythe originel (panneau de Strasbourg).

Les épisodes de la légende sont empruntés à Boccace dans sa Genealogiae deorum, principale source de connaissance de la mythologie pour les artistes de la Renaissance.